В отсутствие кальция хлортетрациклин (ХТ) равномерно распределяется между водной и мембранной фазами, но не флуоресцирует. При добавлении к среде кальция комплекс Са-ХТ частично входит в мембрану в соответствие с коэффициентом распределения между липидной и водной фазами. Однако его концентрация в липидной фазе невысока из-за низкой концентрации в водной фазе (рисунок слева).

При повышении концентрации кальция в матриксе пропорционально растет концентрация комплекса Са-ХТ во внутреннем липидном слое внутренней мембраны митохондрий, и флуоресценция. суспензии существенно усиливается.